Диссертация - Механизмы актин—обусловленной подвижности Бактерии Listeria Monocytogenes
Содержание
СОДЕРЖАНИЕ.
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ...4
I. ВВЕДЕНИЕ...6
II. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ...9
2.1. Актин...9
2.2. Тредмиллинг...12
2.3. Динамика актина в клетке...15
2.4. ADF/кофилины...18
2.5. ПрофилиниТр4...20
2.6. Кэпирующие белки и гельзолин...22
2.7. Комплекс Агр2/3...24
2.8. Белки семейства WASP...27
2.9. Listeria monocytogenes и белок ActA...31
2.10. Белки семейства Ena/VASP...35
III. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ...41
3.1. Белки...41
3.2. Исследование взаимодействия комплекса Агр2/3 и VASP in vitro...41
3.3 Полимеризационные тесты...42
3.4. Видеомикроскопия...42
3.5. Listeria monocytogenes...43
3.6. ActA-полистиреновые бусины...43
3.7. Статистическая обработка данных...45
IV. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ...46
4.1. Для создания новых филаментов комплексом Агр2/3 необходимы плюс-концы существующих актиновых филаментов...46
4.2. Актиновые филаменты, растущие из одного узла разветвления, имеют равные длины...47
4.3. Новые актиновые филаменты растут с плюс-концов филаментов-затравок...48
4.4. Комплекс Агр2/3 не взаимодействует с VASP...51
4.5. VASP не оказывает эффекта на кинетики полимеризации актина в присутствии комплекса Агр2/3, активированного растворимым ActA...51
4.6. VASP увеличивает плотность ветвления актиновых филаментов комплексом Агр2/3, но не меняет кинетики их деветвления...53
4.7. ActA-микросферы...53
4.8. VASP необходим для движения ActA-микросфер...54
4.9. VASP усиливает нуклеаторный эффект комплекса Агр2/3, активированного ActA на поверхности полистиреновых микросфер и Listeria monocytogenes...57
4.10. VASP связывает актиновые филаменты с ActA на поверхности полистиреновых микросфер независимо от комплекса Агр2/3...58
4.11. VASP не связывается с плюс-концами актиновых филаментов и не препятствует кэпированию плюс-концов филаментов кэпирующими белками...59
4.12. VASP не участвует в регуляции процесса кэпирования плюс-концов филаментов кэпирующими белками при движении ActA-микросфер...60
4.13. VASP уменьшает плотность ветвления актиновых филаментов ActA-активированным комплексом Агр2/3, увеличивая расстояние между соседними
точками ветвления...62
^ЗАКЛЮЧЕНИЕ...65
VI. ОСНОВНЫЕ ВЫВОДЫ... ...69
БЛАГОДАРНОСТИ...70
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ...71
ПРИЛОЖЕНИЯ...95
