Диссертация - Разработка липосомальных лекарственный форм для увеличения доставки химиопрепаратов и возможности преодоления множественной лекарственной резистентности
Содержание
ОГЛАВЛЕНИЕ
Список сокращений...2
Введение...6
Часть I. Обзор литературы...ю
Часть И. Собственные исследования...41
Глава 1. Материалы и методы исследования...41
1.1. Материалы и реактивы...41
1.1.1. Среды и сыворотки...41
1.1.2. Реактивы...41
1.1.3. Препараты...41
1.1.4. Моноклональные антитела...41
1.1.5. Клеточные линии...42
1.1.6. Экспериментальная модель опухолевого роста...42
1.1.7. Режимы введения и дозы циклоплатама in vivo...43
1.1.8. Оценка результатов...43
1.2. Методы исследования...44
1.2.1. Метод получения больших многослойных липосом доксорубицина и циклоплатама...44
1.2.2. Получение малых однослойных липосом...44
1.2.3. Метод количественного определения доксорубицина и циклоплатама в липосомах...45
1.2.4. Измерение размера липосом с доксорубицином
и циклоплатамом...46
1.2.5. Прямая реакция иммунофлюоресценции...46
1.2.6. Определение функциональной активности P-gp...46
1.2.7. Определение клеточной гибели...47
1.2.7.1. Проточно-цитофлюориметрический анализ...47
1.2.7.2. Определение гибели клеток с помощью Annexin V...47
1.2.7.3. Исследование цитотоксической активности in vitro
с помощью МТТ-теста...48
1.2.8. Электронно-микроскопическое исследование...49
Глава 2. Создание липосомального доксорубицина и изучение его цитотоксической активности
2.1. Получение больших многослойных липосом
с доксору бицином...50
2.1.1. Методика получения больших многослойных липосом
с доксорубицином...50
2.2. Получение малых однослойных липосом с доксорубицином...51
2.2.1. Методика получения малых однослойных липосом с доксорубицином...51
2.3. Стандартизация малых однослойных липосом
с доксорубицином...51
2.3.1. Измерение размера липосом...51
2.3.2. Количественное определение доксорубицина в липосомах...52
2.4. Элекронно-микроскопическое исследование...54
2.5. Исследование включения доксорубицина внутри липосом...57
2.6. Изучение цитотоксической активности липосом с доксорубицином in vitro...60
2.7. Сравнение липосомального и свободного доксорубицина по накоплению в клетках...69
Глава 3. Создание липосомального циклоплатама и изучение его
цитотоксической активности 3.1. Получение больших многослойных липосом
с циклоплатамом...74
3.1.1. Методика получения больших многослойных липосом
с циклоплатамом...74
3.2. Получение малых однослойных липосом с циклоплатамом...75
3.2.1. Методика получения малых однослойных липосом
с циклоплатамом...75
3.3. Стандартизация малых однослойных липосом
с циклоплатамом...75
3.3.1. Измерение размера липосом...75
3.3.2. Количественное определение доксорубицина в липосомах...76
3.4. Изучение цитотоксической активности липосомального циклоплатама in vitro...78
3.5. Изучение противоопухолевой активности
липосомального циклоплатама in vivo...85
Обсуждение и выводы...90
Список литературы...96
